呋喃妥因試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的AHD,在微孔條上預包被上偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的原理來進行的,樣本中的AHD和微孔條上預包被偶聯(lián)抗原競爭抗呋喃妥因代謝物的衍生物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣品中的AHD含量與樣品的吸光度值呈反比,與標準曲線比較即可得出呋喃妥因代謝物含量。
1、用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。
2、用之后立即將所有試劑放回2-8℃冰箱。
3、在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,仔細按照推薦的洗板順序操作是ELISA測定程序中的要點。
4、所有恒溫孵育過程中,避免光線照射,用蓋板膜封住微孔板。
5、試劑及標本沒有回到室溫(20-25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
6、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會伴隨著出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
7、混合要均勻,否則會出現(xiàn)重復性不好的現(xiàn)象。
8、反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
9、不要使用過了有效日期的試劑盒,稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。
10、不用的微孔板放進自封袋密封;標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
11、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應當棄之。標準的吸光度值小于0.5時,表示試劑可能變質(zhì)。
12、該試劑盒反應溫度為37℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。