Elisa即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗,指將可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上,進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量方法。由于
Elisa試劑盒穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
然而實(shí)驗新手們面對各種各樣的ELISA試劑,內(nèi)心應(yīng)該是崩潰的。如何浪里淘金,選擇既符合研究需求,又品質(zhì)上乘的ELISA試劑呢?
1、你要明確研究種屬:
一般來說,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬,檢索種屬的常用語言為英文。如果需對不同物種的同一因子進(jìn)行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個種屬的ELISA試劑盒,產(chǎn)品介紹中會注明「Multi-species」。
2、要明確樣本類型:
不同廠家驗證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本,根據(jù)樣本處理方式的差異,分為EDTA血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購買前需仔細(xì)核對。
3、要會預(yù)測自己的目標(biāo)因子的濃度:
一般來說,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子IL-6,正常人血清中濃度為3.13pg/mL,病人會顯著增高,CAR-T回輸病人血清中的IL-6濃度甚至為正常人的200倍以上。
因而,必要時進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒很重要。若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測動態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。