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裂谷熱抗體快速檢測卡(膠體金法)
廣州健侖生物科技有限公司
裂谷熱病毒是白纖病毒科(Phenuiviridae)的一個成員,即布尼亞病毒目12個病毒科之一 ,絕大多數(shù)人間感染是與受感染動物的血液或器官直接或間接接觸所造成的。病毒可通過宰殺、幫助接生、獸醫(yī)程序操作或處理畜體或胚胎期間處理動物組織而傳染給人。因此,某些職業(yè)群體,如牧民、農(nóng)民、屠宰工人和獸醫(yī),感染的風(fēng)險較高。
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臺盼藍(trypan blue)是一種細胞活性染料,是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一,常用于檢測細胞膜的完整性或檢測細胞的活力?;罴毎粫蝗境伤{色,而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。臺盼藍染色只需3-5分鐘即可完成,操作非常簡單。
一、染色原理
正常的活細胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠阻止臺盼藍,使之不能夠進入胞內(nèi),細胞不被臺盼藍染色;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,臺盼藍染料可穿透細胞膜,進入細胞,與解體的DNA 結(jié)合,使其著色,從而細胞變藍。
通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經(jīng)死亡。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。
二、染液配制
4%臺盼藍母液:稱取4g臺盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4度保存。使用時,用PBS稀釋至0.4%(相當于再10倍稀釋)。
三、染色方法
制備單細胞懸液,并作適當稀釋(106細胞/ml),取9mL細胞懸液移入試管中,加1mL 0.4%臺盼藍溶液,混勻。
四、結(jié)果觀察